15044156009 全国服务热线:

上一张 下一张

种植技术

当前位置:首页-种植技术

人参、人参叶含量测定方法介绍

发布时间:2017/03/29

  人参为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根及根茎。人参叶为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥叶,二者均收载于2005版《中国药典》一部中。对人参和人参叶的含量测定,2005版药典均采用HPLC法,前者以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1为指标;后者以人参皂苷Rg1和人参皂苷Re为指标。现对有关含量测定方法作一介绍。

  一、高效液相色谱法(HPLC)

  ⑴2005版药典人参、人参叶含量测定项:

  人参:

  色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表进行梯度洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000。

  0-35min:A19%,B81%;35-55min:A19→29%,B81→71%;35-70min:A29%,B71%;70-100min:A29→40%,B71→60%。

  供试品溶液的制备:取本品粉末(过四号筛)约1克,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷加热回流3小时,弃去三氯甲烷液,药渣挥干溶剂,连同滤纸筒移入100ml锥形瓶中,精密加水饱和正丁醇50ml,密塞,放置过夜,超声处理(功率250W,频率50kHz)30分钟,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液25ml,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

  人参叶:

  色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.05%磷酸溶液(100:400)为流动相,检测波长为203nm,理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于1500。

  供试品溶液的制备:取本品粉末10克,精密称定0.2克,置索氏提取器中,加三氯甲烷30ml,加热回流1小时,弃去三氯甲烷液,药渣挥去三氯甲烷,加甲醇30ml,加热回流3小时,提取液挥干,加水10ml使溶解,加石油醚(30--60℃)提取2次,每次10ml,弃去醚液,水液通过D101型大孔吸附脂柱(内径1.5cm,长15cm),以水50ml洗脱,弃去水液。再用20%乙醇50ml洗脱,弃去20%乙醇洗脱液,继用80%乙醇80ml洗脱,收集洗脱液70ml,蒸干,残渣加甲醇溶解并定量转移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

  ⑵有关液相色谱法测定人参皂苷含量的报道,大多测定一种或几种人参皂苷(如人参皂苷Re、Rgl、Rb1)的含量对人参药材及其制剂进行鉴别或定量分析。如(非药典条件):

  徐道娟等采用HPLC法测定参芪降糖颗粒中人参皂苷Re、Rg1的含量。Agilent1100高效液相色谱仪;色谱柱:HypersilBDSCl8柱流动相:乙腈-0.05%磷酸溶液(100:400),流速:0.8ml/min,柱温,30℃,检测波长203nm。人参皂苷Re、Rg1回归方程分别为Y=0.00183A+0.02353r=0.9998,Y=0.0015A-0.0053,r=0.9999,线性范围分别为:1.976-9.880μg,0.968pg-4.840μg。样品处理方法同人参叶。

  梁宁等用HPLC法,以茶碱为内标,氨基键合相为固定相,同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1与Rb1的含量。日立L-7ll0型高效液相色谱仪,日立L-7400型紫外检测器,江申色谱工作站。色谱柱为NH2P-50柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(80:20),流速为1.0mL/min,检测波长为203nm,柱温为室温。人参皂苷Rg1在8O~280μg/mL(r=0.9995),Rb1在8O~240μg/mL(r=0.9993)线性关系良好,Rg1和Rb1加样回收率分别为97.1%和98.4%,RSD分别为2.44%和2.3%(n=9)。

  周迎春等采用高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1、Re、Rb1与三七皂苷R1含量。岛津LC-10ATVP型高效液相色谱仪;岛津SP-10AvP型紫外检测器;ANASTAR色谱工作站;色谱柱为AsahipakNH2P-50(4.6mm×250mm,5μm),固定相为氨基键合相,流动相为乙腈-水(81:19,V:V),流速1.2mL/min,检测波长203nm,柱温:室温。

  文献报道多采用ODS柱对一种人参皂苷单体进行定量,流动相多为乙腈-水、乙腈-磷酸等系统;同时测定几种单体的一般为药典方法或为氨基柱,流动相多为为乙腈-磷酸系统,梯度洗脱法。

  二、薄层扫描法

  张春桃等采用薄层扫描法测定健脾开胃颗粒剂中人参皂苷Rg1、Re的含量。双波长薄层扫描分析仪(CS*930型,日本岛津)。Rg1以氯仿-甲醇-水(25:10:1)为展开剂,Re以正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃下放置下层液为展开剂;10%硫酸乙醇为显色剂,以硅胶G为吸附剂,Rg1:(入s=535nm,入R=660nm),Re:(入s=525nm,入R=700nm)。

  钟华等采用薄层扫描法测定乳结散胶囊中人参皂苷Rb1、Rg1含量。CS-9OOO型双波长薄层扫描仪(日本岛津);定量毛细管(美国Drummond);Larnbdal6紫外分光光度仪(PERKINELMER)。展开剂:氯仿-甲醇-水(13:7:2)lO℃以下放置过夜的下层溶液。双波长反射法锯齿扫描:测定波长入s=520nm,参比波长入R=700nm;线性参数:sx=3;狭缝:1.25mm×1.25mm;灵敏度:中;步距:0.5mm。

  何元凯采用双波长薄层扫描测定血塞通片中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1的含量。CAMAG(TLCSCNNER3)型薄层扫描仪,CAMAG(LINOMATIV)半自动点样仪。正丁醇-醋酸乙酯-水(4:1:5)上层溶液为展开剂。测定波长入s=535nm,参比波长入R=460nm。

  文献报道采用薄层色谱法测定人参皂苷的含量,多为对一种单体进行测定,展开系统多为氯仿-甲醇-水或氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水等。若同时分析几种,一般采用双波长扫描,效果较好。而且供试品溶液的制备是关键。有关文献报道一般采用乙醚脱脂,甲醇提取,正丁醇萃取,碱洗,水洗,上氧化铝柱等过程进行分离、纯化。其中上柱处理是除杂的主要手段,但上柱处理样品费时,操作繁琐,可能产生较大的操作误差。如果经过前期处理,薄层中干扰较少,则可以不经过上柱,同时也可以增加含量测定的准确度。

  有关人参、人参叶极其制剂的含量测定报道较多,采用的方法主要有比色法、分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法等。在这些分析方法中,比色法和分光光度法由于其专属性差、误差大,已逐渐被淘汰。现阶段较常用的是薄层扫描法和高效液相色谱法,而且,高效液相色谱法使用的频率在迅速增加。

上一页:抱歉暂无数据

下一页:人参分类

返回